研究幾種酸純化的具體方法

更新時間：2017-06-19 點擊次數(shù)：1967

　　今天來介紹幾種酸純化的具體方法，以核酸為例，核酸抽提與純化是分子生物學試驗的基礎，核酸純化方法是影響提取核酸質量高低的zui重要因素，也是下游分子生物學試驗成敗的關鍵。
　　1.PC抽提法
　　PC抽提是去除蛋白質有效的手段，但超過了該飽和度，裂解體系中的蛋白質不會被一次去除，必須靠多次抽提，方可*去除。且每次抽提都會損失部分核酸。另外，體系太粘稠的壞處是，蛋白質難以*去除，以及基因組DNA會斷裂得更厲害，所以要注意裂解液與樣品的比例。PC抽提的另外一個用途是，利用酸性酚可以部分去除DNA的特點，在RNA抽提時獲得DNA殘留極少的RNA。不過有一點要提醒的是，某些植物樣品，在去除某些雜質之前，是不能使用PC抽提的，否則核酸必定降解。PC抽提zui大的優(yōu)勢是成本低廉，對實驗條件要求較低，對于經(jīng)費緊張的實驗室較為實用。
　　2.離心柱法
　　離心柱酸純化法，是目前試劑盒提取廣泛應用的方法。其zui大特點是受人為操作因素影響小，純度的穩(wěn)定性很高(雖然純度不一定比PC純化方法更高)。加入的液體通過離心后會進入另外一個離心管中，與含有核酸的柱子*是分開的，所以洗滌更*。其致命弱點是樣品過量，提取效率較低，且需要反復離心，操作復雜，成本也較高。
　　3.生物磁珠法
　　生物磁珠法是將純化介質包被在納米級生物磁珠表面，通過介質對核酸的吸附，在外加磁場下使核酸附著于磁珠定向移動，從而達到固液分離純化的作用。

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